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技術(shù)文章

當(dāng)前位置:首頁(yè)技術(shù)文章C57小鼠皮膚成纖維細(xì)胞原代培養(yǎng)的方法

C57小鼠皮膚成纖維細(xì)胞原代培養(yǎng)的方法

更新時(shí)間:2022-07-14點(diǎn)擊次數(shù):3217
                   實(shí)驗(yàn)方法


      1. 將實(shí)驗(yàn)小鼠脫頸處死,75%乙醇浸泡5min,固定,備皮,取背部皮膚至于含雙抗的冷PBS緩沖液中。

      2. 仔細(xì)剝離脂肪,血管等多余組織,PBS清洗,加胰酶消化1h。

      3. 分離真表皮,去除表皮后,PBS清洗3次。

      4. 將真皮部分于培養(yǎng)皿內(nèi)剪碎,加入適量胰酶,轉(zhuǎn)移至15ml離心管內(nèi),37℃恒溫水浴消化1h。

      5. 消化結(jié)束后,加入H-DMEM*培養(yǎng)基終止反應(yīng),1000rpm離心5min,棄上清。

      6. PBS清洗一遍,離心棄上清。

      7. 將清洗后的組織塊均勻鋪于6cm培養(yǎng)皿內(nèi),加入2ml*培養(yǎng)基,37℃,5%CO2培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)24h。

     8. 第二天,補(bǔ)充培養(yǎng)基至5ml,繼續(xù)培養(yǎng),3-4天后有細(xì)胞游出。

     9. 7天后已有大量細(xì)胞游出,去除組織塊并換新鮮培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。


  • 實(shí)驗(yàn)圖例

取材&分離

圖片111.png



細(xì)胞培養(yǎng)

22222圖片-11.jpg

圖片
END

 

上海昆盟生物科技有限公司 (Coweldgen Scientific Co.,LTD) 是一家專注于生命科學(xué)領(lǐng)域提供相關(guān)試劑產(chǎn)品和服務(wù)的生物高科技企業(yè),坐落于上海聚科生物產(chǎn)業(yè)園。公司提供種類齊全的細(xì)胞系、質(zhì)量穩(wěn)定的細(xì)胞培養(yǎng)試劑產(chǎn)品、成熟高效的技術(shù)服務(wù)、專業(yè)周到的技術(shù)支持。本著“守正創(chuàng)新,科學(xué)嚴(yán)謹(jǐn)"的理念,我們以高標(biāo)準(zhǔn)塑造行業(yè)品牌,以全新視野構(gòu)建現(xiàn)代企業(yè),勇于探索和創(chuàng)新。公司業(yè)務(wù)范圍涉及全國(guó)各省市自治區(qū),與國(guó)內(nèi)多家醫(yī)院、高校、科研院所、生物科技公司建立了良好的合作關(guān)系,贏得了良好的市場(chǎng)聲譽(yù)和廣泛的認(rèn)可,我們保證將繼續(xù)為廣大科研用戶提供專業(yè)、高效、優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品及服務(wù)!細(xì)胞系(帶STR鑒定) | 原代細(xì)胞 | 細(xì)胞培養(yǎng)基 | 血清 | 細(xì)胞培養(yǎng)添加因子 | 標(biāo)記細(xì)胞 | 耐藥細(xì)胞 | 生化檢測(cè)試劑盒 | WB試劑 | 抗體 等;ATAC-seq分析 | ChIP-seq分析 | 宏基因組測(cè)序分析 | 16S rRNA測(cè)序分析 | Pull down實(shí)驗(yàn) | RIP 實(shí)驗(yàn) | ChIP實(shí)驗(yàn) | Co-IP實(shí)驗(yàn) | 質(zhì)譜檢測(cè) | WB檢測(cè) | PCR檢測(cè) | 細(xì)胞培養(yǎng)/增殖/凋亡/周期/遷移/侵襲/自噬 | 活體成像 | 免疫組化 | 電鏡檢測(cè) | micro-CT 檢測(cè)  等。


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